蛋白质翻译后修饰(Post-Translational Modifications, PTMs)广泛参与调控生命活动的各个环节,是蛋白质功能多样化的关键驱动因素。近年来,随着质谱技术的进步,PTMs研究在药物研发中的价值愈加突出,尤其是在新靶点发现、药效机制阐明以及精准治疗策略制定等方面,展现出强大
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圆二色性(Circular Dichroism, CD)是一种基于手性分子对圆偏振光吸收差异的光谱学技术,广泛用于研究蛋白质的二级结构、构象变化、热稳定性和蛋白质折叠过程。CD分析以其非破坏性、高灵敏度和操作便捷等优势,成为蛋白质结构表征的重要工具之一。在生命科学和生物技术领域,CD光谱不仅是基础研
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一、为什么要对单克隆抗体进行De Novo测序? 在抗体药开发与研究中,获取全长抗体氨基酸序列是基础起点。然而,在以下情境中,常规的基因测序路径难以奏效:1、抗体仅有纯化蛋白,无法获得B细胞或mRNA;2、抗体来自外部渠道、文献报道或商业来源,缺乏原始序列信息;3、早期研发阶段或体内筛选出的克隆,需
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Edman降解(Edman Degradation)和质谱(Mass Spectrometry, MS)是两种最常用于解析蛋白质一级结构的蛋白质测序技术。前者基于化学反应的逐级解析,后者依赖物理电离与碎裂的质荷比分析。本文将对这两种技术进行详细比较,以探讨其各自的优缺点及适用场景。 一、技术原理比
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引言:蛋白质药物的“序列盲区”问题 随着生物制药技术的迅猛发展,蛋白质类药物(如单克隆抗体、融合蛋白、重组酶等)已成为新药研发的主力军。然而,在仿制药开发、质量一致性验证、专利规避设计、以及老药回溯等环节中,获取蛋白质药物的完整序列信息成为一项基础而又关键的任务。传统的测序方
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无标记蛋白质定量(Label-Free Quantification, LFQ)以其简便灵活、适用范围广的优势,成为蛋白质组学研究中的重要手段。要在质谱分析中实现高分辨率的无标记定量,必须从样本制备、质谱采集到数据处理各环节进行系统优化,确保数据的准确性、灵敏度与可重复性。 一、样本制备:确保一致
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在蛋白质组学研究中,蛋白质定量是理解细胞状态、疾病机制以及筛选生物标志物的关键环节。随着质谱技术的飞速发展,从早期的2D凝胶方法到当代高通量的TMT(Tandem Mass Tag)和SWATH(Sequential Window Acquisition of All Theoretical Mas
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免疫系统具备高度复杂的动态调控能力,广泛参与抗感染、肿瘤识别、自身免疫、组织修复等过程。研究发现,免疫细胞在发育阶段、微环境影响或刺激条件下常表现出显著的功能异质性。近年来,单细胞技术的快速发展极大推动了免疫研究的分辨率。蛋白质作为功能执行分子,是真正反映细胞生物学状态的关键指标。单细胞蛋白质组学(
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Edman降解(Edman Degradation)自1950年由瑞典科学家Pehr Edman提出以来,已广泛应用于生物化学、蛋白质组学和结构生物学研究。该方法主要用于测定蛋白质N端的氨基酸序列,在蛋白质一级结构分析中仍然发挥着重要作用。然而,随着现代质谱技术的快速发展,Edman降解的应用范围受
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蛋白质的功能由其结构决定,而结构的基础是一级序列。早在20世纪中叶,当人类尚未掌握测序DNA的能力时,蛋白测序已经开启生命结构的探索旅程。而这一切的开端,离不开一个关键发明:Edman降解法。七十余年来,Edman降解见证了从人工手动操作到自动化分析的演进,也在质谱席卷蛋白组学时代后找到新的定位。本
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